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Materiales de referencia y comparaciones interlaboratorios
Figura 2. Transformación de un método instrumental en un método
analítico binario, caracterizado por dar información cualitativa en
forma de respuesta binaria.
Por tanto, es muy importante definir correctamente la zona de inseguridad con respecto al
valor umbral usado para la clasificación de las muestras en un determinado método bina-
rio. De acuerdo con esto, la selección del método binario debe basarse en unas adecuadas
características de sensibilidad y selectividad del método. Una vez que se ha comprobado
la selectividad, el siguiente requisito es que el límite de detección esté por debajo del valor
umbral y proseguir con la optimización del método.
Para métodos binarios basados en señales instrumentales el siguiente paso es la filtración
digital de la señal para dar información cualitativa en forma de respuesta binaria ajustándo-
se al valor umbral.Todo este proceso se muestra en la figura 2.Las correspondientes señales
se pueden representar por S
0
, S y S
1
. La filtración digital produce las siguientes respuestas: 0
para muestras que dan una señal menor o igual que S
0
, 1 para muestras que dan una señal
mayor o igual que S
1
.Para muestras que dan una señal entre S
0
y S
1
la filtración digital da un
“resultado inconcluso”. Se necesita un método de confirmación para este último caso.
Figura 3. Uso de spot tests para el screening y confirmación del con-
trol de nitrito en agua de acuerdo al nivel umbral establecido por la
legislación.
La filtración digital no puede aplicarse al caso de
spots tests visuales debido a la subjetividad de la
respuesta sensorial. Este problema puede resolver-
se incorporando tests de screening y confirmación
tal y como se demuestra con un spot test para el
control de nitrito en agua [19]. El material del test
se prepara con los reactivos del método Shinn don-
de es necesario un medio ácido (HCl). Después de
optimizar el test, solo con variar la concentración de
HCl, la curva ideal de P(x) – x se desplazó a concen-
traciones mayores de nitrito para ajustarse al nivel
umbral de la legislación (0.1 mg L
-1
). Así variando la
concentración de HCl se pueden proponer méto-
dos cualitativos de screening y confirmación para
muestras inconclusas. Esta propuesta se representa
esquemáticamente en la Fig. 3. La concentración
óptima de HCl para obtener una mayor sensibilidad
fue 25% de HCl, pero los falsos positivos que se ob-
tenían estaban en un intervalo de 0.05-0.08 mg L
-1
.
Para el test de screening propuesto utilizando un
30% de HCl la región de inseguridad era de 0.07-0.1
mg L
-1
. Como los falsos positivos se producían en la
región de fiabilidad se propuso un test de confirma-
ción para estas muestras utilizando el spot test 50%
HCl (Zona de inseguridad: 0.1-0.16 mg L
-1
).
Las muestras que son negativas en el test de scree-
ning están por debajo del valor umbral por lo que
no necesitan ser confirmadas. Todas las muestras
positivas con el test de screening real (30% HCl) de-
ben ser estudiadas con el test de confirmación (50%
HCl). Cuando las respuestas que nos dan el test de
screening son positivas se considerarán muestras
positivas verdaderas si las respuestas son positivas
cuando se utiliza el test de confirmación. Las mues-
tras que son positivas con el test de screening y
negativas con el test de confirmación son las que
están en el intervalo de 0.07 y 0.16 mg L
-1
siendo la
situación más complicada. Para estas muestras, se
propone realizar al menos 10 replicados con el mé-
todo de screening y de confirmación. Se calculará
la probabilidad de respuestas positivas P(x) y P´(x),
respectivamente. Estos valores se utilizan para cla-
sificar las muestras en la región de concentraciones
inconclusas. Por ejemplo, utilizando el test de 30%
HCl: 10 respuestas positivas significan C≥0.10 mg L
-1
(muestras positivas verdaderas), mientras que solo
8 o 9 respuestas positivas significa C<0.10 mg L
-1
(muestras negativas verdaderas). Alternativamente,
este muestreo podría ser confirmado con métodos
analíticos cuantitativos.
III.3. El papel de la trazabilidad y la inseguridad
en la validación de los métodos analíticos bina-
rios
La validación es la confirmación mediante examen
y aportación de evidencias objetivas que satisfacen
determinados requerimientos para un uso especi-
ficado. Los métodos analíticos binarios deben ser
validados para su uso en los laboratorios de rutina.
Esta validación comienza con la identificación de las
necesidades informativas de los clientes y continua
con la selección del método de screening que sa-
tisface los requerimientos informativos. Para estos
