III Simposio de Postgrado 2025: Ingeniería, ciencia e innovación

11 195 Estudio del efecto de la suplementación antioxidante para el control del estado oxidativo de células madre mesenquimales derivadas de cordón umbilical humano Cristian Torres D. ¹ , ² , ³* Alejandra Arancibia ³ Paloma Fuentes ³ Claudia Altamirano ³ Ziomara P. Gerdtzen ¹ , ² , ³ ¹ Departamento de Ingeniería Química, Biotecnología y Materiales, Universidad de Chile ² Centro de Biotecnología y Bioingeniería CeBiB, Universidad de Chile ³ IMPACT, Center of Interventional Medicine for Precision and Advanced Cellular Therapy, Santiago, Chile *E-mail: cristian.torres.d@ing.uchile.cl Introducción El cultivo in vitro de células madre mesenquimales humanas (hMSC) en- frenta importantes desafíos, muchos de estos asociados al estrés oxidati- vo inducido por un desequilibrio entre especies reactivas y la capacidad an- tioxidante de las células. Este estado se caracteriza por senescencia y enve- jecimiento, reducción de la capacidad de diferenciación y compromiso de las propiedades terapéuticas. Las MSCs poseen defensas antioxidantes inhe- rentes, pero son fácilmente superadas in vitro, haciendo necesario soporte antioxidante externo. Se propone la suplementación de ácido ascórbico y N-acetilcisteína para mitigar el estrés oxidativo, mejorando la proliferación y salud del cultivo. En este trabajo se realiza un segui- miento al estado oxidativo del medio extracelular mediante la caracteri- zación de su capacidad antioxidante, estableciéndose una relación entre el estado oxidativo del medio y el intra- celular, para diseñar una estrategia de suplementación que permita restable- cer los niveles de estado oxidativo y con esto, la protección celular contra el estrés oxidativo. Metodología Se cultivan hMSC provenientes de un donante único en adhesión a 37°C, en normoxia. Se determina viabilidad ce- lular mediante exclusión por azul de tripán y se realizan curvas de creci- miento y viabilidad celular. Se caracte- riza el metabolismo celular mediante tasas de consumo y/o producción de metabolitos y el estado oxidativo uti- lizando los métodos ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity), DPPH (2,2-difenil-1-picrilhidrazil) y FRAP (Fe- rric Reducing Activity Power). Para estudiar la efectividad y duración de la suplementación antioxidante se realiza un mapeo de suplementación antioxidante sin renovación de medio. Posteriormente, se evalúa la necesi- dad de suplementación antioxidante y/o nutricional cada 48 horas, conside - rando renovación de medio (parcial o total) o shots de antioxidantes. Resultados esperados A partir de la evaluación del impacto en el crecimiento celular de combina- ciones de suplementación antioxidante y la cuantificación de la capacidad an - tioxidante, se identifican posibles estra - tegias que permitan optimizar las con- diciones de cultivo de MSCs. Resumen