III Simposio de Postgrado 2025: Ingeniería, ciencia e innovación

11 181 Efecto de condiciones operacionales y de alimentación en la producción de una enzima endoxilanasa en una cepa de Pichia pastoris recombinante a nivel biorreactor de laboratorio Javiera F. Báez Martínez ¹ , ²* Irene Martínez B. ¹ , ² Oriana Salazar A. ¹ , ² ¹ Departamento de Ingeniería Química, Biotecnología y Materiales, Universidad de Chile ² Centro de Biotecnología y Bioingeniería, Universidad de Chile *E-mail: javiera.fezm@gmail.com Resumen Pichia pastoris (actualmente Komagataella phaffii ) es un sistema eficiente para la producción de proteínas recombinantes, destacado por su capacidad de crecer en medios simples, alcanzar alta densidad celular y metabolizar metanol [1] . En este estudio, se utilizó la cepa KM71 para expresar la xilanasa GtXyn10A del hongo Gloeophyllum trabeum , una enzima clave en la degradación de xilano (hemicelulosa) para generar xilosa y xilooligosacáridos (XOS) con potencial prebiótico [2] . El proceso de fermentación se dividió en cuatro fases: batch (crecimiento inicial), crecimiento (alimentación con glicerol), adaptación (transición con mezcla glice- rol-metanol) e inducción (metanol). Se evaluaron preliminarmente el efecto del pH y la suplementación con PTM1. Entre los objetivos principales, se analizaron tres temperaturas de inducción (20, 25 y 30 °C) y, de manera pendiente, una es- trategia de alimentación exponencial durante la fase de crecimiento. Se evalúa el impacto en la producción proteica y la actividad enzimática. Los estudios de inducción mostraron que, aunque el metanol fue completamente consumido a 20 °C y 25 °C, estas temperaturas no produjeron un aumento sig- nificativo en la expresión de xilanasa. En cambio, a 30 °C se observó una mayor producción enzimática. Además, operar a esta temperatura presenta una ventaja operativa significativa, al eliminar los costos asociados al enfriamiento necesario a temperaturas menores, lo cual resulta beneficioso para el escalado industrial. En conclusión, P. pastoris es una plataforma eficiente para la producción de la xilanasa recombinante GtXyn10A. La operación a 30 °C no solo mejora la expre - sión enzimática sino que también optimiza los costos operativos, subrayando la importancia de equilibrar parámetros fisiológicos y económicos para una pro - ducción enzimática eficiente a escala industrial. __Referencias [1] J. García-Suárez, L. Zumalacárregui- De-Cárdenas, y Z. Santana-Vázquez, "Usos de la levadura Pichia pastoris en la producción de proteínas recombinantes," Scielo (2021) [2] A. F. A. Carvalho, P. De Oliva Neto, D. F. Da Silva, y G. M. Pastore, "Xylo-oligosaccharides from lignocellulosic materials: Chemical structure, health benefits and production by chemical and enzymatic hydrolysis," Food Res . Int. 51, 75–85 (2012)